Ematologia in Fluorescenza

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Reticolociti e Piastrine (metodo ottico)

Reticolociti - CANALE RET

METODO DI ANALISI

La soluzione Colorante (II) contiene il colorante polimetinico. Il colorante penetra attraverso la membrana cellulare, colorando l'RNA nei reticolociti e il DNA/RNA nelle cellule nucleate. I reticolociti sono separati dagli eritrociti maturi in funzione del differente contenuto di RNA e dalle cellule nucleate in funzione del differente contenuto di DNA/RNA. XE 2100 e XT2000 determinano i reticolociti utilizzando il Forward Scatter ed il segnale di
Side Fluorescence.



Maggiore è il contenuto di acidi nucleici in una cellula e maggiore sarà il segnale di Side Fluorescence sull'asse X. Maggiore è la dimensione di una cellula e maggiore sarà l'intensità del segnale di Forward Scatter sull'asse Y. I reticolociti vengono suddivisi in 3 frazioni (HFR,MFR e LFR) in funzione della quantità di RNA. I reticolociti sono chiaramente separati dai leucociti perchè, per le loro caratteristiche di fluorescenza e volume, i leucociti si collocano in un'area dello scattergram RET nettamente distinta da quella dei reticolociti.

 



Il parametro Plt-O (conteggio ottico delle piastrine) è determinato dal Ret- Scattergram. In un campione con una distribuzione anormale delle piastrine, il sistema referta automaticamente il valore di Plt-O. Il conteggio di Plt-O è più affidabile in presenza di grandi piastrine o microcitemie severe. Essendo determinato ad una temperatura di 41°C, il valore di Plt-O risulta essere meno influenzato dalla presenza di crioglobuline.

 


 

 


 

 

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